[基因载体论文]猪bmp15基因报告载体的构建及其特异性

时间：2015-01-15 15:02:10 作者：秦明鸣；魏江华；俞晓

本文作者：秦明鸣；魏江华；俞晓丽；张景龙；刘晓鹏；马晓玲；王华岩；成功正常投稿发表论文到《生物工程学报》2014年02期,引用请注明来源400期刊网！

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【摘要】：为了研究骨形态发生蛋白15(bmp15)基因的表达和调控特性,通过克隆猪bmp15基因2.2kb启动子片段,构建pBMP15-EGFP报告载体,实现监测干细胞向类卵母细胞分化的过程。以猪卵巢组织和中国仓鼠卵巢细胞(CHO)、成肌细胞(C2C12)、猪羊水干细胞(pAFSC)为材料,通过RT-PCR、免疫荧光、细胞转染、显微注射检测bmp15组织特异性表达,并且通过单层细胞诱导检测该基因体外示踪类卵母细胞获得过程的能力。RT-PCR结果显示bmp15在猪的卵巢组织中特异表达,在CHO中表达,而在C2C12和pAFSC中不表达。卵巢组织切片免疫荧光检测结果显示bmp15表达于卵泡发育的各个阶段。瞬时转染不同细胞发现启动子只在CHO中有活性,而在C2C12和pAFSC中均无活性。显微注射重组质粒片段结果显示增强绿色荧光蛋白(EnhancedGreenFluorecenceProtein,EGFP)在卵母细胞体外成熟18h启动表达,并能够持续至4-细胞期胚胎。单层细胞诱导结果显示诱导12d的pAFSC出现携带EGFP的圆形细胞团。说明bmp15具有表达特异性和示踪干细胞诱导分化为类卵母细胞的潜能。
【论文正文预览】：骨形态发生蛋白15(Bonemorphogeneticprotein15,Bmp15)是一种自分泌生长因子,与生长分化因子9(Growdifferentialfactor9,Gdf9)同属于TGFβ家族成员,在早期卵泡的生长发育及排卵过程中起重要作用[1]。bmp15与gdf9都是卵母细胞发育的特异性基因,它们之间具有高度相似的结构
【文章分类号】：S828
【稿件关键词】：猪bmp启动子基因表达猪羊水干细胞
【参考文献】:

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【稿件标题】：[基因载体论文]猪bmp15基因报告载体的构建及其特异性
【作者单位】：西北农林科技大学动物医学院陕西省干细胞工程技术研究中心;陕西万盛肉类加工有限公司;
【发表期刊期数】：《生物工程学报》2014年02期
【期刊简介】：《生物工程学报》杂志是由中华人民共和国新闻出版总署、正式批准公开发行的优秀期刊，生物工程学报杂志具有正规的双刊号，其中国内统一刊号：CN11-1998/Q，国际刊号：ISSN1000-3061。生物工程学报杂志社由中国科学院主管、主办，本刊为月刊。自创刊以来，被公......更多生物工程学报杂志社(http://www.400qikan.com/qk/5081/)投稿信息
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