一、IAPs与泌尿系统肿瘤
与其它恶性肿瘤细胞相似，凋亡缺陷是肾、膀胱、前列腺等泌尿系统肿瘤细胞的显著特征，表现出增殖与凋亡的失衡以及对化疗药物的抵抗。目前，如何以IAPs为靶点，攻克细胞水平上肿瘤细胞的凋亡缺陷与无限增殖，并以此来改进现有的治疗方案受到了广大泌尿外科工作者日益广泛的关注。
1.1Livin
Livin是在黑色素瘤细胞中被鉴定出来的IAPs的最新成员，Livin的转录产物因剪切方式的不同而分为Livin-α和Livin-β两种mRNA亚型。Livin在正常的成人组织中几乎不表达，而在许多恶性肿瘤组织中呈现高表达的现象，被认为与肿瘤的预后以及对放、化疗的抵抗有关。在泌尿系统恶性肿瘤中，Kempkensteffen等[1]应用实时定量RT-PCR及Westernblot检测131例睾丸生殖细胞瘤患者的瘤体切片组织，结果表明Livin表达与睾丸生殖细胞瘤的分化密切相关，可能成为睾丸肿瘤治疗的新靶点。Haferkamp等[2]在组织微阵列中应用免疫组化检测Livin的表达及分布情况，结果发现Livin细胞核内高表达是肾细胞癌患者较好预后的预测因子。本课题组之前的系列研究表明：Livin-α在前列腺癌的起始过程中发挥着重要的作用，Livin-α能够通过调控G1-S细胞周期进而促进前列腺癌细胞的增殖[3]；Livin能够通过影响NF-κB通路及纤粘连蛋白FN（fibronectin）、趋化因子受体CXCR4的表达而调控前列腺癌细胞的侵袭[4]；Livin在前列腺癌中高表达，但在前列腺癌细胞系DU-145中由于miR-198的存在，Livin基因的表达呈现转录后抑制的现象[5]；在前列腺癌细胞中，Livin基因的表达受到锌离子的调控，呈现先降低后升高的现象[6]；应用小干扰RNA（smallinterferingRNA,siRNA）抑制Livin基因在膀胱癌细胞中的表达，能够显著抑制膀胱癌细胞的增值与集落形成能力，并且能够明显增加膀胱癌细胞对凋亡刺激的敏感性[7]；应用RT-PCR方法对36例膀胱癌患者组织标本进行检测，结果发现Livin基因表达与膀胱癌的发生有关，能够成为膀胱癌有效的分子标志物，有望成为临床上膀胱癌诱导凋亡治疗的新靶点[8]。
1.2XIAP
XIAP是通过NAIP表达序列标签（ExpressedSequenceTag，EST）方法从人cDNA文库中鉴定出来的IAPs成员，因其基因位于Xq24-25而命名；XIAP几乎表达于所有正常的成人组织中，并且在多种恶性肿瘤组织中呈现过表达，是目前发现的抑制细胞凋亡能力最强的IAPs家族成员。相比其他IAPs成员，XIAP具有较强的稳定性和高效性，主要通过其BIR2和BIR3结构域直接与活化的Caspase-3、-7、-9相结合，抑制Caspases的酶催化活性，进而调控细胞的凋亡。有关泌尿系统恶性肿瘤，Mizutani等[9]研究发现，XIAP在肾细胞癌中呈现过表达，并且与患者的不良预后相关，XIAP表达沉默能够增强肾癌细胞对Fas/TRAIL诱导的细胞凋亡的敏感性。Nomura[10]等报道，药物顺铂能够通过抑制XIAP的表达而诱导前列腺癌细胞的凋亡，顺铂对XIAP的抑制是化疗药物的重要作用途径。本课题组应用免疫组化，Westernblot及RT-PCR方法对35例膀胱癌患者组织标本进行检测，结果发现膀胱癌复发患者XIAP表达较初发者明显增高，检测XIAP表达可能成为判断膀胱癌预后、预防膀胱癌复发的新指标[11]。由于XIAP是IAPs家族成员中抑制凋亡能力最强的蛋白，因此以XIAP为靶点的抑制剂的研究受到了较多的关注：Bilim等[12]研究发现，应用靶向XIAP蛋白的shRNA和Smac蛋白模拟物小分子N7肽作用于肾癌细胞，能够显著的增强肾癌细胞对化疗药物的敏感性，提示以XIAP蛋白为靶点将成为一种有效的能够克服肾细胞癌耐药的新的治疗策略。
1.3cIAP1/2
cIAP1/2是从TRAF2（TNFReceptorAssociatedFactor2）相关蛋白中鉴定出来的IAPs成员；二者同为细胞核质穿梭蛋白，依赖于CRM1（ChromosomeRegionMaintenance1proteinhomolog）介导的细胞核输出通路；cIAP1的BIR2与BIR3连接区域含有富含亮氨酸的细胞核输出信号（NuclearExportSignal，NES），而在cIAP2中不包括NES；cIAP1的细胞核输出能够被莱普霉素B（LeptomycinB,LMB）所阻断，而LMB对cIAP2的亚细胞分布没有影响；cIAP1和cIAP2普遍的表达于多数正常成人组织中，并且在一些恶性肿瘤组织中呈现过表达。Jönsson等[13]报道，cIAP2是膀胱癌细胞重要的凋亡调控因子，其过表达能够降低肿瘤细胞对凋亡刺激的敏感性，以cIAP2为靶点的免疫治疗与化学毒性药物的联合应用是治疗对传统化疗发生抵抗的膀胱肿瘤的有效策略。McEleny[14]等研究发现，下调cIAP1的表达能够增加前列腺癌细胞的自发性凋亡，使前列腺癌细胞对受体介导的凋亡敏感性增强。Kempkensteffen等[15]应用实时定量RT-PCR对127例肾癌患者的组织标本进行检测，结果发现多数肾细胞癌患者组织样本中cIAP1与cIAP2呈现过表达，并且cIAP1表达与患者的预后密切相关。本课题组应用免疫组化方法对102例不同恶性程度的膀胱癌患者组织标本进行检测，结果发现细胞核中cIAP1的表达与膀胱癌分期、分级、复发率及死亡率密切相关，有望成为膀胱癌患者不良预后的标记物[16]。
1.4Survivin
Survivin是通过其结构与IAPs其它成员的同源性从B细胞淋巴瘤中鉴定出来的，是IAPs中最小的成员，只包含一个BIR结构域；与Livin相类似，Survivin在成人正常终末分化的细胞中几乎不表达，而在多数发生恶性转化的细胞以及在许多常见的恶性肿瘤组织中呈现高表达；研究认为Survivin与肿瘤的发生发展密切相关，因此其最初被称为“普遍肿瘤相关抗原(TAA，universaltumorassociatedantigen)”[17]。在泌尿系统恶性肿瘤中：Zhang等[18]检测Survivin在205例T1/T2期前列腺癌组织中的表达情况，并且对全部患者进行平均时限为102个月的随访，结果发现Surivin高表达的前列腺癌患者发生转移的几率明显高于Survivin低表达的前列腺癌患者；在体外实验中下调Survivin的表达，发现前列腺癌细胞的微管细胞骨架结构发生明显的改变，细胞极性以及动力消失，提示Survivin与前列腺癌的转移有着显著的相关性[19]。Lei等[20]报道，Survivin表达是肾细胞癌患者预后的预测因子，敲除Survivin基因与放疗联合应用可以作为肾细胞癌治疗的新方法。Kitamura[21]应用免疫组化检测125例膀胱癌患者中Survivin的表达与分布情况，结果显示Survivin细胞核中的表达与膀胱癌的生物侵袭能力有关，是膀胱癌患者预后不良的标记物。虽然Survivin没有明显的组织特异性，但是在多种恶性肿瘤组织中呈现高表达，并且在正常组织中几乎不表达，因此Survivin具有较好的肿瘤特异性，可以作为诊断肿瘤的分子标记物：Smith等[22]使用Westernblot和RT-PCR的方法检测46例膀胱癌患者尿液中Survivin的表达情况，结果均为阳性，而在30例膀胱癌治疗后患者的尿液中仅有3例Survivin的表达呈现阳性，在29例其它泌尿生殖系统肿瘤患者的尿液中Survivin的表达均呈现阴性，这说明检测尿液中Surivin的表达有可能成为膀胱癌诊断的新方法。本课题组应用免疫组化及Westernblot对105例膀胱癌患者组织样本进行检测，结果发现在膀胱癌组织样本中，细胞核中Survivin与cIAP1的表达呈现相关性，并且二者共同核表达与膀胱癌患者的预后密切相关[23]。
1.5其他IAPs成员
NAIP是最早发现的IAPs家族成员，在筛选脊髓性肌萎缩（SpinalMuscularAtrophy，SMA）的相关基因中被发现，高表达于神经组织中，与多种神经系统的病变有关。在一些恶性肿瘤组织中，NAIP呈现出显著的高表达，并且与肿瘤的发生发展有关：Chiu等[24]研究发现，在接受雄激素剥夺疗法（AndrogenDeprivationTherapy，ADT）前列腺癌患者的组织样本中，NAIP的表达量显著增加；Gonzalo等[25]研究表明，NAIP在前列腺组织从良性前列腺增生向前列腺癌转化的过程中呈现表达升高的现象。BRUCE是IAPs家族成员中分子量最大的巨型蛋白，在神经胶质瘤中被发现，在促进Caspase-9与Smac的泛素化，介导蛋白酶体降解途径，抑制由Smac诱导的细胞凋亡过程中发挥着重要的作用；BRUCE与肿瘤细胞对化疗药物的抵抗有着密切的联系[26]。ILP2是在正常成人的睾丸组织中被鉴定出来的结构与XIAP高度同源的IAPs家族成员，ILP2高度特异性的表达于人睾丸组织中，被认为与睾丸的发育有着密切的联系[27]。以上两种IAPs成员在泌尿系统恶性肿瘤中的研究比较少见。
二、IAPs的相互作用
IAPs成员起源于含有高度保守序列的同源染色体，结构相似，肿瘤细胞常常同时表达多种IAPs蛋白以增强其对凋亡的抵抗；一些IAPs成员之间也会发生复杂的反应，这些反应可以导致其中某一IAPs成员被抑制，或多种成员协同作用以抵抗凋亡。Mehrotra等[28]应用RNA干扰技术使XIAP与Survinin的表达沉默，结果发现当XIAP与Survinin表达减少时，多种高侵袭性细胞系的迁移及侵袭能力显著降低；之后使XIAP与Survinin在低侵袭性乳腺癌细胞系MCF-7中过表达，发现MCF-7细胞系的迁移及侵袭能力得到了显著的增强；后续的动物实验进一步验证了上述结论，并证实XIAP-Survinin复合物激活了NF-κB信号传导通路，其作用分子为下游的纤维粘连蛋白（Fibronectin，FN）。本课题组研究表明，应用siRNA联合抑制Livin，XIAP和Survivin的表达能够有效的抑制膀胱癌细胞T24的增殖，并且可以更加显著的增加膀胱癌细胞的自发性凋亡[29]。Harlin等[30]报道，XIAP缺陷小鼠并没有表现出明显的凋亡特征，虽然小鼠细胞中XIAP缺失，但细胞中cIAP1与cIAP2蛋白的表达呈现增高趋势；此现象表明当一种IAPs成员表达缺失时细胞中存在一种代偿机制使其他IAPs成员表达增高。由此可见，IAPs成员间通过相互的协同作用及代偿机制一同调控细胞的生命活动。因此，今后的研究应着重于多个IAPs成员联合作用对泌尿系统肿瘤的影响。
三、结语与展望
综上所述，IAPs成员在凋亡最后通路强有力的抑制细胞的凋亡，并且在多个重要细胞传导通路中调节细胞的功能；IAPs成员的高表达与恶性肿瘤的不良预后以及对放、化疗的抵抗密切相关。因此，房产经济论文以IAPs成员为靶点的靶向制剂的研发将为泌尿系统恶性肿瘤的治疗开辟新的途径。
作者：陈骁驰 杨德勇 宋希双 单位：大连医科大学附属第一医院泌尿外科
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