【基因表达载体的构建】玉米C_4型PEPC全长基因的克隆与表达载体

时间：2015-02-12 09:28:24 作者：王雷；崔震海；张立军

本文作者：王雷；崔震海；张立军；成功正常投稿发表论文到《江苏农业科学》2014年11期,引用请注明来源400期刊网！

如果您需要快速发表论文服务，请联系在线编辑！

【摘要】：以玉米自交系郑58基因组DNA为模板,设计了2对特异性引物,分别PCR扩增玉米C4型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)启动子及其全长编码序列,利用In-Fusion技术将两者定向克隆到载体pCAMBIA-1391Z上,并对重组子进行测序验证。结果表明,该PEPC启动子序列与GenBank中的玉米自交系B73的同源性为97.70%,片段长1200bp;全长编码序列同源性为97.90%,片段长6330bp。通过HindⅢ和EcoRⅠ酶切载体pCAMBIA-1391Z,利用In-Fusion技术将线性载体与之前获得的2个PCR片段连接,测序结果与预期序列一致,表明成功构建了pCAMBIA-1391Z-PEPC植物表达载体。对克隆和载体构建中存在的问题进行了讨论,以期为该类型基因的高效克隆及表达载体的构建提供参考、为C4型PEPC基因功能研究和C3植物遗传转化提供可用的基因序列。
【论文正文预览】：根据CO2固定初始产物的不同,可将高等植物分成C3、C4、CAM这3类。以三碳化合物3-磷酸甘油酸为最初光合产物的光合途径为C3途径(或卡尔文循环),以四碳化合物草酰乙酸为最初光合产物的光合途径为C4途径。C4途径具有CO2浓缩机制,能高效利用大气中的CO2,使植物保持较高的光合效率[
【文章分类号】：S513
【稿件关键词】：玉米PEPC基因克隆序列分析表达载体构建
【参考文献】:

陈绪清,张晓东,梁荣奇,张立全,杨凤萍,曹鸣庆;玉米C_4型pepc基因的分子克隆及其在小麦的转基因研究[J];科学通报;2004年19期
林春晶;韦正乙;蔡勤安;侯敬尧;邢少辰;;几种植物转基因表达载体的构建方法[J];生物技术;2008年05期
韩凯;翁建峰;郝转芳;李新海;李明顺;张德贵;白丽;张世煌;薛吉全;谢传晓;;一种快速高效构建植物表达载体的方法[J];玉米科学;2012年01期
龚春梅;宁蓬勃;王根轩;梁宗锁;;C_3和C_4植物光合途径的适应性变化和进化[J];植物生态学报;2009年01期
崔国瑞;张立军;朱延姝;崔震海;李振华;;植物C_4光合途径的形成及其影响因素[J];植物生理学通讯;2009年07期
李卫华,郝乃斌,戈巧英,张其德;C_3植物中C_4途径的研究进展[J];植物学通报;1999年02期
张边江;周梅仙;姚淑;;C_4光合作用的基因工程研究进展[J];安徽农学通报;2006年07期
邢亚南;郑阳;郝建军;于洋;付淑杰;李峰;闵国春;;不同浓度碳酸氢钾对黄瓜幼苗光合作用的影响[J];安徽农业科学;2006年03期
赵艳;陈丽梅;李昆志;;C_4光合作用关键酶PEPC的反应机制[J];安徽农业科学;2006年23期
蔡小宁;陈茜;杨平;任源浩;;磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶的生物信息学分析[J];安徽农业科学;2008年03期
张彬;马建军;贾栋;石云鹭;高志强;丁在松;;小麦导入磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPCase)基因的初步研究[J];安徽农业科学;2009年11期
范书田;艾军;王振兴;许培磊;王新伟;沈育杰;;软枣猕猴桃对光强和二氧化碳浓度的响应[J];北方园艺;2010年20期
李颖畅;马勇;郝建军;张丽华;;提高作物光合作用途径的研究现状[J];长江蔬菜;2009年14期
马清;楼洁琼;王锁民;;Na~+对渗透胁迫下霸王幼苗光合特性的影响[J];草业学报;2010年03期
张利刚;曾凡江;刘波;刘镇;安桂香;李海峰;袁娜;;绿洲-荒漠过渡带四种植物光合及生理特征的研究[J];草业学报;2012年01期
满为群;杜维广;郝迺斌;;大豆高光效育种研究[J];大豆科学;2009年03期
陈双喜;西北太平洋北赤道流分叉处37ka BP以来的高分辨率古海洋记录[D];中国科学院研究生院（海洋研究所）;2011年
左应梅;木薯光合特性的生理生态研究[D];海南大学;2010年
李勇;氮素营养对水稻光合作用与光合氮素利用率的影响机制研究[D];南京农业大学;2011年
陈伟;应用基因沉默技术调节大豆脂肪酸代谢进而选育高油和高油酸大豆新材料[D];东北师范大学;2011年
周三;野生大豆基础生理研究[D];山东师范大学;2002年
杨荣仲;甘蔗C_4磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因植物表达载体构建及转化大豆研究[D];福建农林大学;2002年
王继安;大豆品种光合特性及其与产量关系的研究[D];东北农业大学;2002年
张永平;冬小麦节水高产栽培群体源性能特征及其调控机制[D];中国农业大学;2004年
牛书丽;浑善达克沙地优势豆科植物光合生理特性研究[D];中国科学院研究生院（植物研究所）;2004年
张桂芳;稗草C_4关键酶（PEPC、PPDK）基因的克隆及PEPC基因对水稻和烟草的遗传转化[D];中国农业大学;2005年
舒丽娜;锌胁迫下CO_2浓度升高对三种不同光合途径植物生长发育和锌积累的影响[D];华中农业大学;2010年
易琼;蓝藻PEPC基因转化烟草的生理生化效应研究[D];昆明理工大学;2009年
周磊;水稻分蘖后期水分亏缺补偿节水技术的生理生态机制研究[D];浙江大学;2011年
刘立全;狐尾草遗传转化体系的建立探索[D];山东师范大学;2011年
马冬芹;油葵PEPC基因保守序列的克隆及RNAi载体的构建[D];河北科技大学;2011年
王晓薇;转甘蔗pepc基因籼稻及其与光合作用相关的生理特性分析[D];福建农林大学;2011年
田海燕;冬小麦根系生长发育对不同灌水条件的反应[D];西北农林科技大学;2011年
李艳芳;12个国外引进苜蓿品种光合蒸腾特性的研究[D];西北农林科技大学;2011年
韩凯;超声波辅助细胞穿透多肽介导的花粉遗传转化技术的研究[D];西北农林科技大学;2011年
王路路;6个双列杂交玉米亲本及其杂交株系的生长及光合特性差异分析[D];南京农业大学;2011年
云建英;杨甲定;赵哈林;;干旱和高温对植物光合作用的影响机制研究进展[J];西北植物学报;2006年03期
韩家懋,王国安,刘东生;C_4植物的出现与全球环境变化[J];地学前缘;2002年01期
杨美英;贺红霞;王艳;高倩倩;付雷;朱筱娟;;番茄茄红素β-环化酶基因高效沉默载体构建[J];分子植物育种;2007年01期
徐化学;熊建华;傅彬英;;应用Gateway技术构建水稻OsDAD1基因的RNA干涉载体[J];分子植物育种;2007年01期
张晓东,李冬梅,徐文英,蒋有绎,胡道芬,韩立新;用基因枪将除草剂Basta抗性基因与小麦HMW谷蛋白亚基基因导入小麦获得转基因植株[J];华北农学报;1997年01期
欧阳平;李玉;严红;马立新;;一种载体构建的新方法:一步克隆法[J];湖北大学学报(自然科学版);2007年02期
焦德茂,李霞,黄雪清,匡廷云,戈巧英,郝乃斌,白克智;转PEPC基因水稻具有初级CO_2浓缩机制的生理特点[J];中国科学(C辑:生命科学);2003年01期
信忠保;许炯心;郑伟;;气候变化和人类活动对黄土高原植被覆盖变化的影响[J];中国科学(D辑:地球科学);2007年11期
张方,迟伟,金成哲,王强,张其德,吴乃虎;高粱C4型磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶基因的分子克隆及其转基因水稻的培育[J];科学通报;2003年14期
高东尧;夏兰芹;徐兆师;马有志;李彦舫;原亚萍;李连城;陈明;孙金海;;小麦WVp-1基因表达载体的Gateway技术构建及其遗传转化[J];麦类作物学报;2009年02期
张应华;王小佳;;用于转化甘蓝的胰岛素样生长因子Ⅰ的合成及MAR调控的表达载体构建[J];农业生物技术学报;2004年06期
王祎琴;张文露;张秉强;洪苏玲;;靶向shRNA表达载体构建方式的比较研究[J];生物技术通报;2007年01期
凌华,李璐,韩放,于艳波,李景鹏;防御素基因克隆和表达载体构建[J];东北农业大学学报;2004年04期
张秉强,唐霓,黄爱龙,闫歌,陶鹏,Tong-Chuan He,张君;shRNA表达载体构建方法的优化[J];生物技术通报;2004年06期
余云舟,金宁一,王罡,李昌,张洪勇,郑敏,季静,王萍;口蹄疫病毒结构蛋白P1基因植物表达载体构建及鉴定[J];吉林农业大学学报;2004年01期
张文茂;彭楠;佘群新;葛向阳;;硫化叶菌超表达载体构建及Mre11的表达[J];华中农业大学学报;2012年03期
马建;魏益凡;厉志;王丕武;;植物RNA干扰表达载体构建方法的研究[J];安徽农业科学;2009年18期
胡兰;隋世慧;吴丹;;MSTN RNAi双元表达载体构建及效果试验[J];中国兽医杂志;2013年07期
吕永智;黎波;;人Troponin I的表达载体构建诱导表达和纯化及活性测定[J];西南农业大学学报(自然科学版);2006年05期
高大中;林清芳;王存芳;魏建民;王茅雁;;玉米ZmCBL6基因的克隆及其植物表达载体构建[J];内蒙古农业大学学报(自然科学版);2009年04期
周红梅;郭晓令;徐宁迎;;C.elegans fat-1基因克隆及其家兔表达载体构建[A];中国动物遗传育种研究进展——第十五次全国动物遗传育种学术讨论会论文集[C];2009年
陶爱林;何韶衡;;重叠引物与桥式PCR结合进行过敏原蛋白表达载体构建[A];中华医学会第二次全国变态反应学术会议论文汇编[C];2004年
李征;毕跃东;刘知微;曾献武;;重组人活性蛋白C的基因克隆、表达载体构建、以及在哺乳动物细胞中的高效表达[A];2006年全国生化与生物技术药物学术年会论文集[C];2006年
周红梅;徐宁迎;郭晓令;;C.elegans fat-1基因克隆及其家兔表达载体构建[A];第十二次全国畜禽遗传标记研讨会论文集[C];2010年
邵长利;张亚兰;吕茂民;李卉;章金刚;;基于自体全血凝集的三特异分子基因表达载体构建[A];中国输血协会第四届输血大会论文集[C];2006年
杨敬;廖雯君;王国华;何峰蓉;朱惠芬;戴红;周玮;吴雄文;张金元;沈关心;;可溶性mPDL1-hIgGFc表达载体构建、表达及对诱导细胞增殖与凋亡的影响[A];第六届全国免疫学学术大会论文集[C];2008年
李克;王琳;成军;张玲霞;陆荫英;李莉;;丙型肝炎病毒核心蛋白基因的表达载体构建及在酵母中的表达[A];中华医学会第七次全国感染病学术会议论文汇编[C];2001年
钱炳俊;李光地;汪垣;周志刚;张大兵;;含新型乙型肝炎抗原基因SS1的马铃薯表达载体构建及其表达[A];华东六省一市生物化学与分子生物学会2003年学术交流会论文摘要集[C];2003年
马欣荣;谈心;陈筑;张燕;张义正;;烟草花叶病毒siRNA设计及其植物表达载体构建[A];中国细胞生物学学会2005年学术大会、青年学术研讨会论文摘要集[C];2005年
严红;植物人工微RNA（amiRNA）表达载体构建的方法学研究及其应用[D];华中农业大学;2010年
张应华;核基质结合区（MAR）调控的胰岛素样生长因子-1表达载体构建与转化甘蓝的研究[D];西南农业大学;2004年
张莉;山羊卵泡刺激素基因的克隆、序列分析及表达载体构建[D];东北农业大学;2003年
张文茂;硫化叶菌超表达载体构建及应用[D];华中农业大学;2011年
曹军;果实特异性表达载体构建与功能鉴定[D];山东农业大学;2003年
石玉强;人乳铁蛋白基因的克隆、表达载体构建及细胞表达的研究[D];西北农林科技大学;2003年
胡刚;PML-RARα与hGM-CSF/hIL-2基因的真核双表达载体构建和表达研究[D];暨南大学;2007年

【稿件标题】：【基因表达载体的构建】玉米C_4型PEPC全长基因的克隆与表达载体构建
【作者单位】：沈阳农业大学生物科学技术学院/辽宁省植物基因工程技术研究中心;
【发表期刊期数】：《江苏农业科学》2014年11期
【期刊简介】：《江苏农业科学》杂志是由中华人民共和国新闻出版总署、正式批准公开发行的优秀期刊，江苏农业科学杂志具有正规的双刊号，其中国内统一刊号：CN32-1214/S，国际刊号：ISSN1002-1302。江苏农业科学杂志社由江苏省农业科学院主管、江苏省农业科学院主办，本刊为......更多江苏农业科学杂志社(http://www.400qikan.com/qk/6196/)投稿信息
【版权所有人】：王雷；崔震海；张立军；