毕赤酵母表达系统|重组人表皮生长因子在毕赤酵母中的表达纯化及

本文作者：廖小金；肖清江；庄露；周卫东；陈清西；成功正常投稿发表论文到《厦门大学学报(自然科学版)》2014年06期,引用请注明来源400期刊网！

【摘要】：构建并筛选出重组人表皮生长因子(rhEGF)高表达的毕赤酵母(Pichiapastoris)基因工程菌株,于30L发酵罐进行中试发酵按1∶15接种15LFBSM发酵,pH6.0、28~30℃、DO20%~30%、流加甲醇诱导发酵42h,rhEGF的表达量可达1g/L.采用疏水层析、离子交换柱层析及分子筛凝胶层析的方法分离纯化rhEGF,获得的rhEGF试制品的纯度大于95%,得率在40%以上.通过基质辅助激光解吸电离/飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)测定rhEGF的分子质量为5946.309u,与理论分子质量一致.N端蛋白序列分析仪分析其N端氨基酸序列,测序结果与理论的氨基酸序列一致.采用Balb/c3T3细胞增殖/MTT比色法测定其活性,测定rhEGF的活性为1.0×106IU/mg,与WHO标准品相当.本研究实现了毕赤酵母高效表达rhEGF并纯化得到符合《中国药典》标准的rhEGF,为工业化生产rhEGF提供基础.
【论文正文预览】：表皮生长因子(epidermalgrowthfactor,EGF)是一种广泛存在于人和动物体内的能够促进表皮细胞的增殖和角化作用的生长因子.1962年StanleyCohen首次在小鼠颌下腺中发现并分离出小鼠EGF,20世纪70年代确定了具有活性的小鼠EGF的氨基酸组成及其结构;人表皮生长因子(hEGF)于1975
【文章分类号】：Q78
【稿件关键词】：表皮生长因子(EGF)表达纯化
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【稿件标题】：毕赤酵母表达系统|重组人表皮生长因子在毕赤酵母中的表达纯化及鉴定
【作者单位】：厦门大学生命科学学院;厦门特宝生物工程股份有限公司;
【发表期刊期数】：《厦门大学学报(自然科学版)》2014年06期
【期刊简介】：0......更多厦门大学学报(自然科学版)杂志社(http://www.400qikan.com/qk/11390/)投稿信息
【版权所有人】：廖小金；肖清江；庄露；周卫东；陈清西；

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