[蛋白表达与纯化论文]HBoVVP1-U蛋白抗原的表达纯化

时间:2015-03-23 14:02:14 作者:漆正宇;龚英浩;

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【摘要】:目的人博卡病毒(HBoV)是近几年发现的一种导致人支气管炎的病原体,本研究旨在表达纯化其VP1衣壳蛋白独有区(VP1-U)抗原,为免疫学诊断治疗奠定基础。方法优化HBoVVP1-UDNA密码子,以适应大肠杆菌原核表达密码子亲嗜性。将密码子优化改造的DNA序列克隆到pET30a(+)原核表达载体,C末端融合表达组氨酸亲和纯化标签。LB培养基增菌,IPTG诱导表达。采用自行设计的纯化缓冲液体系,镍株亲和纯化,超滤浓缩。结果VP1-U蛋白表达效率约为50%,纯化活性蛋白浓度为3.3mg/ml。结论经过密码子优化,合理设计工艺流程,原核表达系统可以高效表达纯化VP1-U活性蛋白抗原。
【论文正文预览】:人博卡病毒(HumanBocavirus,HBoV)为2005年首次报道的一种感染人呼吸道的细小病毒[1],是人支气管炎的一种病原体[2,3]。细小病毒外观呈球形无包膜的正20面体,直径大约20-25nm[4]。HBoV基因组为单链DNA,全长大约5.6kb,主要编码的蛋白有NS1、NP-1、VP1、VP2等[1]。其衣壳蛋白包
【文章分类号】:R392.1
【稿件关键词】:HBoVVP-U抗原纯化
【参考文献】:
【稿件标题】:[蛋白表达与纯化论文]HBoVVP1-U蛋白抗原的表达纯化
【作者单位】:北京大学深圳医院中心实验室;病毒基因工程国家重点实验室;贵州大学生命科学院;
【发表期刊期数】:《中国实验诊断学》2014年08期
【期刊简介】:《中国实验诊断学》杂志是由中华人民共和国新闻出版总署、正式批准公开发行的优秀期刊,中国实验诊断学杂志具有正规的双刊号,其中国内统一刊号:CN22-1257/R,国际刊号:ISSN1007-4287。中国实验诊断学杂志社由中华人民共和国教育部主管、主办,本刊为月刊。......更多中国实验诊断学杂志社(http://www.400qikan.com/qk/6974/)投稿信息
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