【组织型纤溶酶原激活剂】人纤溶酶原激活物抑制物1基因克隆表达

时间：2015-03-25 08:19:01 作者：任芳；张青云；王雅明

本文作者：任芳；张青云；王雅明；徐建军；成功正常投稿发表论文到《中华检验医学杂志》2007年11期,引用请注明来源400期刊网！

如果您需要快速发表论文服务，请联系在线编辑！

【摘要】：目的克隆人纤溶酶原激活物抑制物1(PAI1)基因,制备和鉴定针对人PAI1的单克隆抗体,以检测PAI1在乳腺癌中的表达。方法利用逆转录(RT)-PCR方法从人乳腺癌细胞株MDA231总RNA中扩增克隆PAI1基因,构建其原核表达质粒,并表达MS2-PAI1融合蛋白。以纯化的融合蛋白免疫BALB/C小鼠,常规细胞融合和选择性培养,亚克隆筛选出单克隆细胞株,纯化单克隆抗体。利用蛋白印迹(Wb)、免疫组织化学法检测分析PAI1在乳腺癌中的表达水平。结果克隆了1209bp的PAI1基因全长片段。经ELISA双筛,获得2株能稳定分泌抗PAI1单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其分泌抗体亚类均为IgG1,且均能特异识别PAI1,并与其他蛋白无交叉反应。Wb结果显示,该抗PAI1单抗与MS2-PAI1融合蛋白以及细胞中的天然蛋白均能结合。免疫组织化学染色结果显示,该单抗与人乳腺癌细胞株MDA231和乳腺癌组织结合后,呈阳性反应。结论克隆了人PAI1基因,通过原核表达产物制备并纯化了针对PAI1的单克隆抗体。初步检测PAI1能在乳腺癌细胞和乳腺癌组织中表达,这为深入研究PAI1基因功能和检测临床肿瘤组织及体液中的PAI1奠定了可靠基础。
【论文正文预览】：纤溶酶原激活物抑制物一1(PA川是丝氨酸蛋白酶抑制剂超家族的成员,为379个氨基酸组成的单链糖蛋白,相对分子质量大约54000〔‘1,被认为是尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase一typeplasminogenaetivator,uPA)和组织型纤溶酶原激活物(tissue一typeplasminogenaetivator,tpA)
【文章分类号】：R737.9
【稿件关键词】：抗体单克隆肿瘤人纤溶酶原激活物抑制物-
【参考文献】:

陆毓,李世淑,彭宜君;实验性肾炎的研究——Ⅰ.兔抗肾抗体肾炎模型的制备[J];第二军医大学学报;1980年01期
李世淑,陆毓,彭宜君;实验性肾炎的研究——Ⅱ.兔抗肾抗体肾炎的免疫学变化[J];第二军医大学学报;1980年01期
王守良,俞树荣,张桂香,向信礼;免疫电镜对实验感染小鼠体内Q热立克次体的检出[J];第三军医大学学报;1980年03期
付利成;抗生素的放射免疫测定法[J];中国抗生素杂志;1980年01期
赵秀文,刘静,耿彩荣;链霉素致敏性的实验研究[J];中国抗生素杂志;1980年06期
宗永生,陈灼怀,张汝逢,姚庆云,吴荫棠;鼻咽癌患者血清中对EB病毒的补体结合抗体滴度与病理组织学改变之间关系的研究[J];中山大学学报(医学科学版);1980年01期
宗永生,张汝逢,闵华庆,吴荫棠,陈灼怀,姚庆云,陈剑经,李新章,胡希棠;鼻咽癌患者治疗前血清中EB病毒的EA-IgG滴度与病理改变的关系的研究[J];中山大学学报(医学科学版);1980年03期
张元和,汤秀兰,林特夫,唐素兰,杨景福;胸腺素过敏原性测定方法[J];蚌埠医学院学报;1980年01期
John Salvaggio,朱德钟;临床免疫学试验的应用及说明——美国医学讲学团讲题之四[J];重庆医学;1980年02期
卢仲毅;用免疫粘附血球凝集反应观察白痢粪便中人轮状病毒抗原的变化[J];重庆医学;1980年02期
焦李成;王磊;;免疫全局优化计算[A];中国体视学学会’99学术报告会论文集[C];1999年
肖因琪;;免疫组化在病理诊断中的应用[A];中国病理生理学会中专教育委员会第七次学术交流会论文汇编[C];1999年
潘家秀;龔祖埙;魯子賢;曹天欽;;肌原纤維上蛋白质定位問題的研究 Ⅰ.标記抗体的电子显微鏡观察在副肌球蛋白定位問題上的初步应用[A];中国生理科学会学术会议论文摘要汇编（生物化学）[C];1964年
Gury．M．F．T．;杨月欣;;用ELISA方法测定低收入巴西妇女的初乳与成熟乳中的分泌性IgA[A];第一届妇幼营养学术研讨会资料汇编[C];1989年
俞光岩;Juergen Ussmueller;Karl．Donath;;涎腺膜性基底细胞腺瘤的组织发生学研究[A];第二届中国国际暨第五届全国口腔颌面外科学术会议论文集[C];1998年
卢利;王兆元;王玉新;;人舌鳞癌侵袭行为的观察及某些与舌鳞癌侵袭、颈淋巴结转移相关因素的研究[A];第二届中国国际暨第五届全国口腔颌面外科学术会议论文集[C];1998年
东耀峻;谢正其;付强;;同种异体牙免疫原性及~(60)Co照射处理后免疫原性变化的实验研究[A];第二届中国国际暨第五届全国口腔颌面外科学术会议论文集[C];1998年
罗中华;黄文华;胡祖祥;;中草药对改善烫伤小鼠受损免疫功能的作用[A];全国第三届烧伤外科学术交流会议论文摘要[C];1991年
雷曼苹;府伟灵;;人抗内毒素类脂A轻、重链可变区基因的克隆[A];中华医学会第五次全国烧伤外科学术会议论文汇编[C];1997年
太光平;汪仕良;王裴;尤忠义;;白细胞介素10转基因对内毒素休克的保护作用的实验研究[A];中华医学会第五次全国烧伤外科学术会议论文汇编[C];1997年
余海若;查清抗体的隐秘[N];大众科技报;2000年
湖南省性病控制中心丁胜非;怎样看梅毒化验单[N];大众卫生报;2000年
记者郑灵巧;关小艾滋病危险“窗口”[N];健康报;2000年
湖北省人民医院核医学科陈辉霖;亚急性甲状腺炎与甲状腺机能亢进症[N];健康报;2000年
倪明张广毓;新法测定过敏原[N];江苏科技报;2000年
王丹红;鱼疫苗产生自身抗体[N];科学时报;2000年
罗国安温涛王义明;免疫亲和毛细管电泳及应用研究[N];科学时报;2000年
记者张可喜;转基因水稻生产球蛋白[N];人民日报;2000年
高唐;加拿大遇菌变色的食品新包装问世[N];中国食品质量报;2000年
广发天河;东盛科技：发展生物药业产业[N];信息时报;2000年
汪家琦;鸡蛋中主要生物活性物质的制备及应用性质的研究[D];东北农业大学;2000年
文维延;脂多糖交叉表位模拟肽的研究[D];第一军医大学;2000年
刘国东;日本血吸虫等电化学免疫传感器及DNA与传感载体相互作用的研究[D];湖南大学;2001年
颜永红;掺胺氢化碳膜的特性与应用研究[D];湖南大学;2001年
乔传玲;表达禽流感病毒HA-NA、HA-NP及NP基因重组禽痘病毒的构建及其免疫效力的研究[D];中国农业科学院;2001年
欧瑜;猪链球菌2型毒力相关蛋白的检测及其基因片段的克隆与表达[D];南京农业大学;2001年
王进荣;抑制素被动免疫对母牛卵泡发育和生殖内分泌的影响及作用机制研究[D];南京农业大学;2001年
何娅妮;人纳/二羧基转运蛋白1的融合表达及其在肾结石发病中的作用[D];军医进修学院;2001年
卢洋;基于FIt3L基因和Anti-CTLA4抗体的抗肿瘤免疫联合治疗的实验研究[D];第二军医大学;2001年
李承新;人源性抗角蛋白单链抗体的构建、表达和Fab片段生物学作用及其分子机理的研究[D];第四军医大学;2001年
时国庆;甲磺隆压电免疫传感器及其土壤结合残留的研究[D];中国农业科学院;2000年
樊景凤;鸭肝炎病毒免疫种鸭抗体消长规律及其雏鸭母源抗体变化的研究[D];东北农业大学;2000年
朱兴国;嗜水气单胞菌J-1株W菌毛的提纯、特性分析及其基因定位[D];南京农业大学;2000年
张晓娟;生长抑素基因工程疫苗相关检测方法的研究[D];南京农业大学;2000年
霍淑娟;新型SSTR疫苗、IGFBP疫苗对畜禽生产性能和内分泌的影响[D];南京农业大学;2000年
杨洪吉;hDAF转基因猪器官移植实验研究[D];暨南大学;2000年
刘登宇;应用斑点金免疫渗滤法检测华支睾吸虫抗体的研究[D];广西医科大学;2000年
万业宏;抗角蛋白16单克隆抗体对恶性角质形成细胞增殖活性的影响及其作用的分子机制[D];第四军医大学;2000年
柴青芬;应用生物素—亲和素预定位技术对荷人大肠癌裸鼠模型MR免疫显像的实验研究[D];第一军医大学;2000年
陈治;血管内皮生长因子及受体在大肠肿瘤血管靶向治疗中的应用研究[D];第一军医大学;2000年

【稿件标题】：【组织型纤溶酶原激活剂】人纤溶酶原激活物抑制物1基因克隆表达和单克隆抗体的制备及其初步应用
【作者单位】：北京大学临床肿瘤医院
【发表期刊期数】：《中华检验医学杂志》2007年11期
【期刊简介】：《中华检验医学杂志》杂志是由中华人民共和国新闻出版总署、正式批准公开发行的优秀期刊，中华检验医学杂志杂志具有正规的双刊号，其中国内统一刊号：CN11-4452/R，国际刊号：ISSN1009-9158。中华检验医学杂志杂志社由中国科学技术协会主管、中华医学会主办，......更多中华检验医学杂志杂志社(http://www.400qikan.com/qk/6448/)投稿信息
【版权所有人】：任芳；张青云；王雅明；徐建军；

相关专题：专业代写毕业论文 sci论文代发