【库尔勒香梨价格】适合库尔勒香梨SCoT分析用的DNA提取方法研究

时间:2015-03-29 18:33:53 作者:和世玉;牛建新;

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【摘要】:【目的】有效利用SCoT分子标记法对库尔勒香梨优良营养系中相关基因,获得高质量基因组DNA,对目前常用的3种提取植物基因组DNA的方法进行比较研究,研究最适合库尔勒香梨SCoT分析的DNA提取方法。【方法】采用改良CTAB法,改良SDS法和试剂盒法从库尔勒香梨优良营养系的叶片中提取基因组DNA。采用NANODROP2000核酸仪检测DNA浓度和纯度,并用1.2%琼脂糖凝胶电泳检测其完整性。以3种方法提取的基因组DNA为模板分别进行SCoT-PCR。【结果】改良CTAB法提取的基因组DNA的浓度为600~1600ng/μL,A260/A280为1.8~2.0,A260/A2302.0,电泳结果显示:有一条清晰的带,有拖尾现象,点样孔发亮;改良SDS法提取的基因组DNA的浓度为600~900ng/μL,A260/A280为1.8~2.0,A260/A230为1.9~2.2,电泳结果显示:一条清晰的带,无拖尾现象只有一个点样孔发亮;试剂盒法提取的基因组DNA的浓度为100~200ng/μL,A260/A280为1.8~2.0,A260/A230为2.2~2.5,电泳结果显示:一条清晰的带,无拖尾,无点样孔发亮现象,蛋白、多糖、酚类物质、RNA等去除彻底;以3种方法提取的基因组DNA为模板进行SCoTPCR,PCR产物电泳结果显示:试剂盒法提取的DNA可以扩增出7条清晰明亮的带,改良CTAB法提取的DNA只能扩增出4条清晰的带,改良SDS法提取的DNA只能扩增出2条带。【结论】比较目前常用的3种提取植物基因组DNA的方法,综合成本高低,毒性大小,步骤多少,时间长短,试剂盒法是最适合提取库尔勒香梨优良营养系叶片基因组DNA的方法。
【论文正文预览】:AGenomicDNAExtractionMethodofKorlaFragrantPearforSCoTAnalysisHEShi-yu,NIUJian-xin(DepartmentofHorticulture,CollegeofAgronomy,ShiheziUniversity/KeyLaboratoryofHorticultural0引言【研究意义】库尔勒香梨(PyrusbrestschneideriRehd)(以下简
【文章分类号】:S661.2
【稿件关键词】:库尔勒香梨DNA提取SCoT分子标记
【参考文献】:
【稿件标题】:【库尔勒香梨价格】适合库尔勒香梨SCoT分析用的DNA提取方法研究
【作者单位】:石河子大学农学院/园艺作物栽培生理与种质资源利用重点实验室;
【发表期刊期数】:《新疆农业科学》2014年08期
【期刊简介】:《新疆农业科学》杂志是由中华人民共和国新闻出版总署、正式批准公开发行的优秀期刊,新疆农业科学杂志具有正规的双刊号,其中国内统一刊号:CN65-1097/S,国际刊号:ISSN1001-4330。新疆农业科学杂志社由新疆农业科学院主管、主办,本刊为月刊。自创刊以来,......更多新疆农业科学杂志社(http://www.400qikan.com/qk/6098/)投稿信息
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